Фенотипирование лимфоцитов что это такое


Иммунофенотипирование лимфоцитов: показания, показатели

Иммунофенотипирование лимфоцитов является одним из методов, применяемых в клинической диагностике. Его основа — особая реакция, отмечаемая между антигенами и антителами. Она применяется для определения, какой тип кровяных клеток имеет место в исследуемом материале. При работе используются особые метки, которые соединены с антигенами. Они позволяют отслеживать реакции в материале и фиксировать количество исследуемых клеток крови. Знание объёма вида тех или иных клеток помогает в диагностике опухолевых процессов.

Метод исследования, условия, необходимые для проведения

Для проведения исследования необходима венозная кровь

При исследовании определяется принадлежность клеток крови к тому или иному виду. Для проведения анализа требуется использование специального оборудования — цитофлюориметра. Также могут применяться микроскопы, при помощи которых фиксируют люминесцирующие метки и проводят их точный подсчёт. Оборудование должно давать возможность опознать каждую специальную метку в исследуемом материале.

Кровь для исследования берут из вены утром. Обычно приём пищи запрещается за 10 часов до процедуры. Исключаются физические и эмоциональные нагрузки перед анализом, а также употребление алкоголя.

Забор крови производят в вакуумную пробирку.

Кровь в пробирке обязательно перемешивают, медленно переворачивая ёмкость 10 раз. Транспортируют в лабораторию материал при температуре от 18 до 23 градусов, вертикально установив пробирку. Максимальный срок хранения взятого материала сутки. Само исследование занимает менее 5 часов.

Количественный состав каких клеток отражает результат анализа?

Интерес представляют клетки лимфоцитарного ряда

При исследовании интерес представляют несколько видов клеток. В бланке исследования будут зафиксированы полученные данные.

  1. Здоровые полноценные лимфоциты. Фиксируется абсолютное количество лимфоцитов, которые не деформированы, имеют правильное круглое ядро. Патологические изменения в них отсутствуют.
  2. Лимфоциты Т-клеточные. Ядро клеток формируется в вилочковой железе и тимусе. Клетки контролируют работу В-лимфоцитов, образующих ряд антител.
  3. Количество Т-хелперов. Одна из разновидностей T-лимфоцитов. Они обеспечивают правильный иммунный ответ организма при обнаружении чужеродного антигена. Данные клетки первого типа предупреждают развитие раковых клеток, а второго — действуют на агрессивные аллергены.
  4. Лимфоциты Т-цитотоксические. Они отвечают за уничтожение собственных клеток организма, если они поражены. Это свойство помогает противостоять опухолевым процессам, тяжёлыми бактериальными заболеваниями, когда возбудитель паразитирует внутри клетки.
  5. В-лимфоциты. Отвечают за выработку веществ, которые отвечают за правильность работы гуморального иммунитета.
  6. ЕК-клетки. Это естественные киллеры, действие которых избирательное и направленное на клетки с неопластическими изменениями.
  7. ЕКТ. Также природные киллеры, которые уничтожают патологические клетки, замаскированные под Т-лимфоциты.
  8. Иммунорегуляторный индекс. Он отражает соотношение Т-цитотоксических клеток и Т-хелперов.

Расшифровкой результатов исследования занимается только врач, давший направление на анализ.

Показания к исследованию

Исследование назначается при подготовке к трансплантации

Исследование проводится по ряду показаний. В общую программу диспансеризации данный анализ не входит. Показания для проведения исследования следующие:

  • инфекционные патологии, если они затяжные или хронические;
  • сильные аллергии;
  • наличие симптомов иммунодефицита различной природы;
  • подозрения на рост опухолевых новообразований раковой или доброкачественной природы;
  • заболевания аутоиммунного характера;
  • тяжёлые плановые операции;
  • подготовка к пересадке внутренних органов;
  • длительный приём лекарственных препаратов, которые могут повлиять на лимфоциты.

В ряде случаев исследование показано и беременным женщинам, если есть риск того, что иммунная система может вызвать отторжение плода.

О чем говорят повышенные и пониженные Т-лимфоциты

Пониженные Т-лимфоциты могут указывать на «иммунный паралич»

Отклонения показателя от нормы в большую сторону указывает на развитие воспаления иммунной природы. Чаще всего явление связано с лимфолейкозом, некоторыми вирусными и бактериальными заболеваниями, а также переходом патологии в хроническую форму. Отклонение в меньшую сторону указывает на иммунологический паралич. Такое явление обычно сопровождает период активного развития раковых опухолей. Также возможно присутствие поражений сердца.

Колебание числа В-лимфоцитов

Повышенный показатель указывает на наличие воспалений в острой или хронической формах. Заболевание может быть вызвано аллергическими, инфекционными или аутоиммунными процессами. При падении уровня компонента крови речь может идти о вирусной инфекции, раковом новообразовании или очаговом воспалении бактериальной природы.

Отклонения показателей естественных киллеров

Изменение показателя выше нормы указывает на тяжёлую, запущенную онкологию, сильные хронические воспаления или чрезмерное синтезирование антигенов против вирусов и бактерий. Понижение показателя возникает из-за высокого уровня Т-лимфоцитов и связано с состояниями, вызывающими его.

Показатели Т-цитотоксических лимфоцитов

Уровень Т-лимфоцитов изменяется при аутоиммунной патологии

Повышение показателя указывает на развитие опухолевого процесса. Также возможно тяжёлое вирусное заболевание в активной форме. Понижение показателя связано с состояниями, развивающимися по причине аутоиммунных нарушений.

Какие процессы определяются по уровню Т-хелперов

Высокие показатели указывают на воспаление в острой форме. Особенно высокие показатели отмечаются при аутоиммунных воспалениях. Снижение показателя связано с вторичным иммунодефицитом и иммунологическим параличом.

Отклонения значений по уровню Т-ЕК клеток

Увеличение показателя возможно по причине хронического воспаления, активной инфекции, присутствующей в организме длительное время, и воспалительных осложнений. Падение значения не имеет диагностической ценности.

Поделиться:

gidanaliz.ru

Иммунофенотипирование лимфоцитов - проведение анализа и расшифровка

Одним из методов клинической диагностики является исследование крови способом иммунофенотипирования лимфоцитов. В его основе реакция между антителами и антигенами, которая используется для определения типов клеток крови, взятых из образцов биологического материала – крови, лимфатических узлов или костного мозга.

Анализ проводится с использованием специальных маркеров или меток, которые присоединяются к антигенам клеток. С помощью лабораторного оборудования отслеживают маркеры, производят подсчет клеток крови. Знание количества каждой из них позволяет квалифицировать опухолевые заболевания, подтвердить диагноз пациенту с определением конкретного его типа, например: достоверно установить вид лимфомы, лейкоза. Такая точная диагностика позволяет сделать выбор наиболее эффективной схемы лечения.

Метод исследования, условия, необходимые для проведения

Иммунофенотипирование – это исследование лимфоцитов, которое помогает увидеть клетки крови, распознать их принадлежность к определенному виду. Исследование проводят с использованием современного диагностического оборудования – цитофлюориметров или особых микроскопов, способных опознавать люминесцирующие составляющие, которые помогают различать разновидности люминесцирующих кровяных телец, вести точный их подсчет в каждой пробе. Оборудование позволяет опознать каждую из меток. Маркирование клеток это добавление в пробу антикоагулянта (реагент К2ЭДТА).

Забор образца для анализа производится из вены в области локтевого сустава. Для точного результата пациент должен соблюсти условия – проба берется натощак в утреннее время. В некоторых случаях допускается легкий прием пищи за 4 часа до процедуры, пациенту можно выпить небольшое количество обычной воды. Занятия спортом накануне диагностики или прием алкоголя запрещен, нарушение запрета приводит к искаженным результатам анализа. Повышенная психоэмоциональная нагрузка недопустима.

Для взятия крови специалист использует вакуумную пробирку. Ее применение позволяет достичь точного результата исследования, снизить болевые ощущения, точно произвести соотношение биологического материала и реагента.

После того, как образец поместили в пробирку, лаборант перемещает взятую пробу с антикоагулянтом, для этого требуется 10 раз медленно перевернуть емкость.

Для хранения и транспортировки материала для анализа требуется соблюдение условий: температурного режима при хранении образца от 18 до 23°С, сохранения положения пробирки вертикально. Срок ожидания результатов не превышает 24 часов от взятия пробы. Время проведения исследования 4 часа.

Количественный состав каких клеток отражает результат анализа?

В ходе проведения исследования специалисты клинической лаборатории отслеживают показатели в периферической крови пациента, возможные поражения. На бланк анализа заносят показатели:

  1. Абсолютное количество лимфоцитов, имеющих здоровое округлое ядро без патологий.
  2. Содержание Т-клеточных лимфоцитов – ядро этого вида кровяных телец образуется и созревает в тимусе или вилочковой железе. Обеспечивает иммунную реакцию организма в определенных условиях, осуществляет контроль над гуморальным ответом организма работой В-лимфоцитов, которые образовывают антитела. Обозначают ядро Т-клеточного лимфоцита как CD3+.
  3. Количественное значение Т-хеплеров (ядро обозначается CD3+CD4+) – разновидности Т-лимфоцитов, оптимальное количество которых в крови способствуют усилению иммунного ответа организма на поражение чужеродным антигеном, их 2 типа. Т-клеточный хелпер первого типа является «защитником» от опухолевых новообразований, вирусных агентов, участвует в защитных воспалительных реакциях. Второй Т-клеточный тип обеспечивает взаимосвязь с гуморальным иммунитетом, участвует в выработке иммуноглобулина Е – веществе, воздействующим на агрессивные аллергены внешней среды, смягчает поражение ими.
  4. Количество Т-цитотоксических лимфоцитов, ядро которых принято обозначать как CD3+CD8+. Такие лимфоциты распознают поражение клеток собственного организма и проводят их лизис или растворение. Таким способом организм борется с опухолевыми тканями, с поражением бактериями, которые паразитируют на клеточном уровне. Ядро Т-цитотоксического лимфоцита важный компонент иммунитета, направленного на уничтожение вирусов.
  5. В-лимфоциты, обозначаемые символами СD19+, вырабатывают активные вещества (антитела), действие которых направлено на поддержание гуморального иммунитета.
  6. Количество ЕК-клеток, их ядро обозначается как CD3-CD16+CD56+. Их называют естественными, или натуральными, киллерами. Такое название определяет их неиммунная цитологическая активность, которая направлена на клетки-мишени, имеющие неопластические изменения.
  7. Т-ЕК (ЕКТ) клетки, ядро которых имеет естественную киллерную активность, защищают от поражения клеток, имеющих качества и признаки Т-лимфоцитов.
  8. Иммунорегуляторный индекс, который показывает соотношение Т-хелперов и Т-цитотоксических клеток в крови, обозначается в анализе в виде соотношения CD3+CD4+/CD3+CD8+.

Когда назначают исследование?

Фенотипирование видов лимфоцитов назначают для диагностики ряда заболеваний. Иммунологи назначают исследование, если имеются основания заподозрить одни из них или при наличии «ярких» признаков других. Например: расшифровка количества лимфоцитов с определенным фенотипом понадобится при:

  • инфекционных заболеваниях, поражении хронического характера или если болезнь имеет затяжной характер,
  • аллергических реакциях организма,
  • проявлении устойчивых признаков и симптомов, указывающих на иммунодефицит врожденного или приобретенного свойства,
  • подозрении на опухолевые образования доброкачественной или злокачественной природы,
  • заболеваниях аутоиммунного типа, спровоцированных расстройством защитной системы, поражением собственного организма,

Диагностика периферической крови требуется в других случаях. Ее назначат перед серьезным оперативным вмешательством, которое требуется больному в плановом порядке. При иммунофенотипировании врач узнает все процессы иммунного характера, происходящие у конкретного больного, что позволяет скорректировать защитные процессы, избежать клеточного поражения, и нормализовать их работу. Большое значение для врача имеют показатели различных видов кровяных телец, Т-клеточный состав крови в послеоперационный период, особенно в случаях с развитием патологических процессов.

Метод применяют и для оценки состояния человека, которому требуется трансплантация органов или проведена операция – анализ на иммунофенотипирование проведут на подготовительном этапе и во время послеоперационного восстановления, чтобы предупредить поражение и отторжение органа. Направление на анализ получают пациенты, лимфоциты которых могут изменить качественный и количественный состав из-за лечения заболеваний медикаментами определенных групп – иммуномодуляторами, иммунодепрессантами или цитостатиками.

Нормы и референсные значения содержания в крови частиц определенного вида зависят от возраста пациента. Врачи для оценки показателей используют специальные таблицы, в которых указаны оптимальные значения, пределы отклонений.

Какие проблемы отражают повышенные и пониженные Т-клеточные лимфоциты

Результат анализа покажет отклонение от нормы по количеству Т-клеточных лимфоцитов. Повышение их количества свидетельствует об иммунном воспалении, поражении или гиперактивности защитных процессов пациента. Такое превышение нормы вызывают заболевания – лимфолейкоз (острая и хроническая стадии), ряд вирусных и бактериальных инфекций в начале развития болезни. Увеличение Т-лимфоцитов возможно при изменении характера заболевания, переход его в хроническую форму.

Если у обследуемого абсолютное число Т-клеточных лимфоцитов снижено, говорят о развитии иммунологического паралича. Он сопровождает воспалительный процессы, может указывать на развитие злокачественных опухолевых новообразований. Такой показатель выявляется, если больная сердечная мышца – миокард, при некоторых сложных травмах, его снижение вызывает курение.

Колебание числа В-лимфоцитов

Увеличение числа В-лимфоцитов сигнализирует о поражении организма воспалительным процессом, развивающимся в острой или хронической стадии. Его природа аллергического, аутоиммунного или инфекционного характера. Эти лимфоциты увеличиваются из-за В-лимфолейкоза, бронхиальной астмы, муковисцидоза, больной печени и при хронических патологиях. Увеличенные показатели по В-лимфоцитам в анализе отражают восстановление после инфекций, перенесенных в острой и тяжелой форме.

Если число В-лимфоцитов не соответствует нижним пределам нормы, при проведении дополнительной диагностики врач подтвердит пациенту развитие опухолевых новообразований, острые вирусные инфекции или инфекции бактериального типа, развитие очагов воспаления в организме больного.

Отклонения показателей естественных киллеров

Повышенному уровню естественных киллеров способствуют патологические процессы, связанные с:

  • запуском онкологических процессов,
  • тяжелым течением воспалительного процесса, воспалительные заболевания в хронической стадии,
  • с избыточной выработкой антигенов, борющихся с бактериальным или вирусным процессом.

Содержание в клетках крови естественных киллеров может быть снижено из-за повышения уровня в крови Т-лимфоцитов и связано с процессами, вызывающими такое повышение.

Показатели Т-цитотоксических лимфоцитов

Если значение показателя CD8+ в превышающих норму цифрах, закономерно заподозрить опухолевое заболевание, вирусный процесс в активной стадии (при развитии вирусной, грибковой или внутриклеточной инфекции, заболеваний подобного типа).

Сниженные значения Т-цитотоксических лимфоцитов в результатах анализа предупреждают о процессах, развивающихся на фоне аутоиммунных болезней. Такой процесс подтверждает атаку аллергенов, развитие аллергии на момент обследования.

Какие процессы определяются по уровню Т-хелперов

Повышение содержание Т-хеплеров свидетельствует об остром воспалительном процессе в активной стадии. Иммунное воспаление отражает увеличение Т-хеплеров первого типа, рост показателя по второму типу определяет наличие воспалительного процесса аллергической природы. Обострение аутоиммунной патологии определяется, если Т-хеплеры обоих типов увеличены.

Снижение Т-хелперов происходит из-за состояния иммунологического паралича, выявляет иммунодефицит вторичного типа у больного.

Отклонения значений по уровню Т-ЕК клеток

Количество Т-ЕК клеток повышается, увеличиваясь по отношению к референсным значениям их содержания в крови по причине:

  • наличия хронических воспалительных процессов с длительным периодом воздействия на иммунную систему,
  • воспалительных процессов, сопровождаемых тяжелым протеканием, осложнениями при лечении,
  • сохранение инфекции в активном состоянии в клетках организма на протяжении значительного периода времени.

Сниженные лимфоциты такого вида не отображают значимые процессы, не являются важными для диагностики.

Использование метода иммунофенотипирования лимфоцитов позволяет проводить диагностику патологий, заподозрить развитие опасных, опухолевых болезней. Метод является безопасным для обследуемого, не требует значительных финансовых затрат.

(Пока оценок нет) Загрузка...

dlja-pohudenija.ru

Условия для иммунофенотипирования лимфоцитов – для чего его проводят?

Одним из методов клинической диагностики является исследование крови способом иммунофенотипирования лимфоцитов. В его основе – реакция между антителами и антигенами, которая используется для определения типов клеток крови, взятых из образцов биологического материала – крови, лимфатических узлов или костного мозга.

Анализ проводится с использованием специальных маркеров или меток, которые присоединяются к антигенам клеток. С помощью лабораторного оборудования отслеживают маркеры, производят подсчет клеток крови. Знание количества каждой из них позволяет квалифицировать опухолевые заболевания, подтвердить диагноз пациенту с определением конкретного его типа, например: достоверно установить вид лимфомы, лейкоза. Такая точная диагностика позволяет сделать выбор наиболее эффективной схемы лечения.

Метод исследования, условия, необходимые для проведения

Иммунофенотипирование – это исследование лимфоцитов, которое помогает увидеть клетки крови, распознать их принадлежность к определенному виду. Исследование проводят с использованием современного диагностического оборудования – цитофлюориметров или особых микроскопов, способных опознавать люминесцирующие составляющие, которые помогают различать разновидности люминесцирующих кровяных телец, вести точный их подсчет в каждой пробе. Оборудование позволяет опознать каждую из меток. Маркирование клеток – это добавление в пробу антикоагулянта (реагент К2ЭДТА).

Забор образца для анализа производится из вены в области локтевого сустава. Для точного результата пациент должен соблюсти условия – проба берется натощак в утреннее время. В некоторых случаях допускается легкий прием пищи за 4 часа до процедуры, пациенту можно выпить небольшое количество обычной воды. Занятия спортом накануне диагностики или прием алкоголя запрещен, нарушение запрета приводит к искаженным результатам анализа. Повышенная психоэмоциональная нагрузка недопустима.

Для взятия крови специалист использует вакуумную пробирку. Ее применение позволяет достичь точного результата исследования, снизить болевые ощущения, точно произвести соотношение биологического материала и реагента.

После того, как образец поместили в пробирку, лаборант перемещает взятую пробу с антикоагулянтом, для этого требуется 10 раз медленно перевернуть емкость.

Для хранения и транспортировки материала для анализа требуется соблюдение условий: температурного режима при хранении образца от 18 до 23°С, сохранения положения пробирки – вертикально. Срок ожидания результатов не превышает 24 часов от взятия пробы. Время проведения исследования – 4 часа.

Сбор биоматериала для анализа

Количественный состав каких клеток отражает результат анализа?

В ходе проведения исследования специалисты клинической лаборатории отслеживают показатели в периферической крови пациента, возможные поражения. На бланк анализа заносят показатели:

  1. Абсолютное количество лимфоцитов, имеющих здоровое округлое ядро без патологий.
  2. Содержание Т-клеточных лимфоцитов – ядро этого вида кровяных телец образуется и созревает в тимусе или вилочковой железе. Обеспечивает иммунную реакцию организма в определенных условиях, осуществляет контроль над гуморальным ответом организма – работой В-лимфоцитов, которые образовывают антитела. Обозначают ядро Т-клеточного лимфоцита как CD3+.
  3. Количественное значение Т-хеплеров (ядро обозначается CD3+CD4+) – разновидности Т-лимфоцитов, оптимальное количество которых в крови способствуют усилению иммунного ответа организма на поражение чужеродным антигеном, их 2 типа. Т-клеточный хелпер первого типа является «защитником» от опухолевых новообразований, вирусных агентов, участвует в защитных воспалительных реакциях. Второй Т-клеточный тип обеспечивает взаимосвязь с гуморальным иммунитетом, участвует в выработке иммуноглобулина Е – веществе, воздействующим на агрессивные аллергены внешней среды, смягчает поражение ими.
  4. Количество Т-цитотоксических лимфоцитов, ядро которых принято обозначать как CD3+CD8+. Такие лимфоциты распознают поражение клеток собственного организма и проводят их лизис или растворение. Таким способом организм борется с опухолевыми тканями, с поражением бактериями, которые паразитируют на клеточном уровне. Ядро Т-цитотоксического лимфоцита – важный компонент иммунитета, направленного на уничтожение вирусов.
  5. В-лимфоциты, обозначаемые символами СD19+, вырабатывают активные вещества (антитела), действие которых направлено на поддержание гуморального иммунитета.
  6. Количество ЕК-клеток, их ядро обозначается как CD3-CD16+CD56+. Их называют естественными, или натуральными, киллерами. Такое название определяет их неиммунная цитологическая активность, которая направлена на клетки-мишени, имеющие неопластические изменения.
  7. Т-ЕК (ЕКТ) – клетки, ядро которых имеет естественную киллерную активность, защищают от поражения клеток, имеющих качества и признаки Т-лимфоцитов.
  8. Иммунорегуляторный индекс, который показывает соотношение Т-хелперов и Т-цитотоксических клеток в крови, обозначается в анализе в виде соотношения CD3+CD4+/CD3+CD8+.

Когда назначают исследование?

Фенотипирование видов лимфоцитов назначают для диагностики ряда заболеваний. Иммунологи назначают исследование, если имеются основания заподозрить одни из них или при наличии «ярких» признаков других. Например: расшифровка количества лимфоцитов с определенным фенотипом понадобится при:

  • инфекционных заболеваниях, поражении хронического характера или если болезнь имеет затяжной характер;
  • аллергических реакциях организма;
  • проявлении устойчивых признаков и симптомов, указывающих на иммунодефицит врожденного или приобретенного свойства;
  • подозрении на опухолевые образования доброкачественной или злокачественной природы;
  • заболеваниях аутоиммунного типа, спровоцированных расстройством защитной системы, поражением собственного организма;

Диагностика периферической крови требуется в других случаях. Ее назначат перед серьезным оперативным вмешательством, которое требуется больному в плановом порядке. При иммунофенотипировании врач узнает все процессы иммунного характера, происходящие у конкретного больного, что позволяет скорректировать защитные процессы, избежать клеточного поражения, и нормализовать их работу. Большое значение для врача имеют показатели различных видов кровяных телец, Т-клеточный состав крови в послеоперационный период, особенно в случаях с развитием патологических процессов.

Метод применяют и для оценки состояния человека, которому требуется трансплантация органов или проведена операция – анализ на иммунофенотипирование проведут на подготовительном этапе и во время послеоперационного восстановления, чтобы предупредить поражение и отторжение органа. Направление на анализ получают пациенты, лимфоциты которых могут изменить качественный и количественный состав из-за лечения заболеваний медикаментами определенных групп – иммуномодуляторами, иммунодепрессантами или цитостатиками.

Нормы и референсные значения содержания в крови частиц определенного вида зависят от возраста пациента. Врачи для оценки показателей используют специальные таблицы, в которых указаны оптимальные значения, пределы отклонений.

Ядро В-лимфоцита

Какие проблемы отражают повышенные и пониженные Т-клеточные лимфоциты

Результат анализа покажет отклонение от нормы по количеству Т-клеточных лимфоцитов. Повышение их количества свидетельствует об иммунном воспалении, поражении или гиперактивности защитных процессов пациента. Такое превышение нормы вызывают заболевания – лимфолейкоз (острая и хроническая стадии), ряд вирусных и бактериальных инфекций в начале развития болезни. Увеличение Т-лимфоцитов возможно при изменении характера заболевания, переход его в хроническую форму.

Если у обследуемого абсолютное число Т-клеточных лимфоцитов снижено, говорят о развитии иммунологического паралича. Он сопровождает воспалительный процессы, может указывать на развитие злокачественных опухолевых новообразований. Такой показатель выявляется, если больная сердечная мышца – миокард, при некоторых сложных травмах, его снижение вызывает курение.

Колебание числа В-лимфоцитов

Увеличение числа В-лимфоцитов сигнализирует о поражении организма воспалительным процессом, развивающимся в острой или хронической стадии. Его природа – аллергического, аутоиммунного или инфекционного характера. Эти лимфоциты увеличиваются из-за В-лимфолейкоза, бронхиальной астмы, муковисцидоза, больной печени и при хронических патологиях. Увеличенные показатели по В-лимфоцитам в анализе отражают восстановление после инфекций, перенесенных в острой и тяжелой форме.

Если число В-лимфоцитов не соответствует нижним пределам нормы, при проведении дополнительной диагностики врач подтвердит пациенту развитие опухолевых новообразований, острые вирусные инфекции или инфекции бактериального типа, развитие очагов воспаления в организме больного.

Отклонения показателей естественных киллеров

Повышенному уровню естественных киллеров способствуют патологические процессы, связанные с:

  • запуском онкологических процессов;
  • тяжелым течением воспалительного процесса, воспалительные заболевания в хронической стадии;
  • с избыточной выработкой антигенов, борющихся с бактериальным или вирусным процессом.

Содержание в клетках крови естественных киллеров может быть снижено из-за повышения уровня в крови Т-лимфоцитов и связано с процессами, вызывающими такое повышение.

Показатели Т-цитотоксических лимфоцитов

Если значение показателя CD8+ – в превышающих норму цифрах, закономерно заподозрить опухолевое заболевание, вирусный процесс в активной стадии (при развитии вирусной, грибковой или внутриклеточной инфекции, заболеваний подобного типа).

Сниженные значения Т-цитотоксических лимфоцитов в результатах анализа предупреждают о процессах, развивающихся на фоне аутоиммунных болезней. Такой процесс подтверждает атаку аллергенов, развитие аллергии на момент обследования.

Как действует ядро зрелого Т-цитотоксического лимфоцита

Какие процессы определяются по уровню Т-хелперов

Повышение содержание Т-хеплеров свидетельствует об остром воспалительном процессе в активной стадии. Иммунное воспаление отражает увеличение Т-хеплеров первого типа, рост показателя по второму типу определяет наличие воспалительного процесса аллергической природы. Обострение аутоиммунной патологии определяется, если Т-хеплеры обоих типов увеличены.

Снижение Т-хелперов происходит из-за состояния иммунологического паралича, выявляет иммунодефицит вторичного типа у больного.

Отклонения значений по уровню Т-ЕК клеток

Количество Т-ЕК клеток повышается, увеличиваясь по отношению к референсным значениям их содержания в крови по причине:

  • наличия хронических воспалительных процессов с длительным периодом воздействия на иммунную систему;
  • воспалительных процессов, сопровождаемых тяжелым протеканием, осложнениями при лечении;
  • сохранение инфекции в активном состоянии в клетках организма на протяжении значительного периода времени.

Сниженные лимфоциты такого вида не отображают значимые процессы, не являются важными для диагностики.

Использование метода иммунофенотипирования лимфоцитов позволяет проводить диагностику патологий, заподозрить развитие опасных, опухолевых болезней. Метод является безопасным для обследуемого, не требует значительных финансовых затрат.

lechiserdce.ru

Оценка показателей клеточного иммунитета

Первым исследованием всегда является подсчет лейкоцитарной формулы (см. главу «Гематологические исследования»). Оцениваются как относительные, так и абсолютные значения количества клеток периферической крови.

Определение основных популяций (Т-клетки, В-клетки, натуральные киллеры) и субпопуляций Т-лимфоцитов (Т-хелперы, Т-ЦТЛ). Для первичного исследования иммунного статуса и выявления выраженных нарушений иммунной системы ВОЗ рекомендовано определение CD3, CD4, CD8, CD19, CD16+56, соотношение CD4/CD8. Исследование позволяет определить относительное и абсолютное количество основных популяций лимфоцитов: Т-клетки – CD3, В-клетки – CD19, натуральные киллеры (NK) – CD3- CD16++56+, субпопуляции Т лимфоцитов (Т-хелперы CD3+ CD4+, Т-цитотоксические CD3+ CD8+ и их соотношение).

Метод исследования

Иммунофенотипирование лимфоцитов проводится c использованием моноклональных антител к поверхностным дифференцировочным ангинам на клетках иммунной системы, методом проточной лазерной цитофлуорометрии на проточных цитофлуориметрах.

Выбор зоны анализа лимфоцитов производится по дополнительному маркеру CD45, который представлен на поверхности всех лейкоцитов.

Условия взятия и хранения образцов

Венозная кровь, взятая из локтевой вены, утром, строго натощак, в вакуумную систему до указанной на пробирке метки. В качестве антикоагулянта используется К2ЭДТА. После взятия пробирку с образцом медленно переворачивают 8-10 раз для перемешивония крови с антикоагулянтом. Хранение и транспортировка строго при 18–23°С в вертикальном положении не более 24 ч.

Невыполнение этих условий приводит к некорректным результатам.

Интерпретация результатов

Т-лимфоциты (CD3+ клетки). Повышенное количество свидетельствует о гиперактивности иммунитета, наблюдается при острых и хронических лимфолейкозах. Увеличение относительного показателя встречается при некоторых вырусных и бактериальных инфекциях в начале заболевания, обострениях хронических заболеваний.

Снижение абсолютного количества Т-лимфоцитов свидетельствует о недостаточности клеточного иммунитета, а именно о недостаточности клеточно-эффекторного звена иммунитета. Выявляется при воспалениях разнообразной этиологии, злокачественных новообразованиях, после травмы, операций, инфаркта, при курении, приеме цитостатиков. Повышение их числа в динамике заболевания – клинически благоприятный признак.

В-лимфоциты (CD19+ клетки) Снижение наблюдается при физиологических и врожденных гипогаммаглобулинемиях и агаммаглобулинемиях, при новообразованиях иммунной системы, лечении иммунодепрессантами, острой вирусной и хронической бактериальной инфекциях, состоянии после удаления селезенки.

Увеличение отмечается при аутоиммунных заболеваниях, хронических заболеваниях печени, циррозе, муковисцедозе, бронхиальной астме, паразитарных и грибковых инфекциях. Характерно в период реконвалесценции после перенесенных острых и хронических вирусных и бактериальных инфекций. Выраженное увеличение наблюдается при хроническом В-лимфолейкозе.

NK-лимфоциты с фенотипом CD3-CD16++56+ Натуральные киллеры (NK-клетки) – популяция больших гранулярных лимфоцитов. Они способны лизировать клетки-мишени, инфицированные вирусами и другими внутриклеточными антигенами, опухолевые клетки, а также другие клетки аллогенного и ксеногенного происхождения.

Увеличение количества NK-клеток связано с активацией антитрансплантационного иммунитета, в некоторых случаях отмечается при бронхиальной астме, встречается при вирусных заболеваниях, повышается при злокачественных новообразованиях и лейкозах, в периоде реконвалесценции.

Снижение наблюдается при врожденных иммунодефицитах, паразитарных инфекциях, аутоиммунных заболеваниях, облучении, лечении цитостатиками и кортикостероидами, стрессе, дефиците цинка.

Т-лимфоциты хелперы с фенотипом CD3+CD4+ Увеличение абсолютного и относительного количества наблюдается при аутоиммунных заболеваниях, может быть при аллергических реакциях, некоторых инфекционных заболеваниях. Это увеличение свидетельствует о стимуляции иммунной системы на антиген и служит подтверждением гиперреактивных синдромов.

Снижение абсолютного и относительного количества Т-клеток свидетельствует о гипореактивном синдроме с нарушением регуляторного звена иммунитета, является патогномичным признаком для ВИЧ-инфекции; встречается при хронических заболеваниях (бронхитах, пневмониях и т.д.), солидных опухолях.

Т-цитотоксические лимфоциты с фенотипом CD3+ CD8+ Повышение выявляется практически при всех хронических инфекциях, вирусных, бактериальных, протозойных инфекциях. Является характерным для ВИЧ-инфекции. Снижение наблюдается при вирусных гепатитах, герпесе, аутоиммунных заболеваниях.

Соотношение CD4+/CD8+ Исследование соотношения CD4+/CD8+ (CD3, CD4, CD8, CD4/CD8) рекомендовано только для мониторинга ВИЧ-инфекции и контроля эффективности АРВ терапии. Позволяет определить абсолютное и относительное количество Т-лимфоцитов, субпопуляций Т-хелперов, ЦТЛ и их соотношение.

Диапазон значений – 1,2–2,6. Снижение наблюдается при врожденных иммунодефицитах (синдром Ди-Джоржи, Незелофа, Вискотта-Олдрича), при вирусных и бактериальных инфекциях, хронических процессах, воздействии радиации и токсических химических веществ, множественной миеломе, стрессе, снижается с возрастом, при эндокринных заболеваниях, солидных опухолях. Является патогномичным признаком для ВИЧ-инфекции (менее 0,7).

Увеличение значения более 3 – при аутоиммунных заболеваниях, остром Т-лимфобластном лейкозе, тимоме, хроническом Т-лейкозе.

Изменение соотношения может быть связано с количеством хелперов и ЦТЛ у данного пациента. Например, снижение количества CD4+ Т-клеток при острой пневмонии в начале заболевания ведет к снижению индекса, а ЦТЛ при этом могут не измениться.

Для дополнительного исследования и выявления изменений иммунной системы при патологиях требующих оценки наличия острого или хронического воспалительного процесса и степени его активности, рекомендуется включать подсчет количества активированных Т-лимфоцитов с фенотипом CD3+HLA-DR+ и ТNK–клеток с фенотипом CD3+CD16++56+.

Т-активированные лимфоциты с фенотипом CD3+HLA-DR+ Маркер поздней активации, показатель гиперреактивности иммунитета. По экспрессии данного маркера можно судить о выраженности и силе иммунного ответа. Появляется на Т-лимфоцитах после 3-го дня острого заболевания. При благоприятном течении заболевания снижается до нормы. Увеличение экспрессии на Т-лимфоцитах может быть при многих заболеваниях, связанных с хроническим воспалением. Отмечено его повышение у пациентов с гепатитом С, пневмониями, ВИЧ-инфекцией, солидными опухолями, аутоиммунными заболеваниями.

ТNK-лимфоциты с фенотипом CD3+CD16++CD56+ Т-лимфоциты, несущие на своей поверхности маркеры CD16++ CD 56+. Эти клетки имеют свойства как Т-, так и NK-клеток. Исследование рекомендовано как дополнительный маркер при острых и хронических заболеваниях.

Снижение их в периферической крови может наблюдаться при различных органоспецифических заболеваниях и системных аутоиммунных процессах. Увеличение отмечено при воспалительных заболеваниях разной этиологии, опухолевых процессах.

Исследование ранних и поздних маркеров активации Т-лимфоцитов (CD3+CD25+, CD3-CD56+, CD95, CD8+CD38+) дополнительно назначают для оценки изменений ИС при острых и хронических заболеваниях, для диагностики, прогноза, мониторинга течения заболевания и проводимой терапии.

Т-активированные лимфоциты с фенотипом CD3+CD25+, рецeптор к ИЛ2 CD25+ – маркер ранней активации. О функциональном состоянии Т-лимфоцитов (CD3+) свидетельствует количество экспрессирующих рецепторов к ИЛ2 (CD25+). При гиперактивных синдромах количество этих клеток возрастает (острые и хронические лимфолейкозы, тимома, отторжение трансплантата), кроме того, повышение их может свидетельствовать о ранней стадии воспалительного процесса. В периферической крови их можно выявить в первые три дня болезни. Снижение числа этих клеток может наблюдаться при врожденных иммунодефицитах, аутоиммунных процессах, ВИЧ-инфекции, грибковых и бактериальных инфекциях, ионизирующей радиации, старении, отравлении тяжелыми металлами.

Т-цитотоксические лимфоциты с фенотипом CD8+CD38+ Присутствие CD38+ на ЦТЛ лимфоцитах отмечено у пациентов с разными заболеваниями. Информативный показатель при ВИЧ-инфекции, ожоговой болезни. Увеличение числа ЦТЛ с фенотипом CD8+CD38+ наблюдается при хронических воспалительных процессах, онкологических и некоторых эндокринных заболеваниях. При проведении терапии показатель снижается.

Субпопуляция натуральных киллеров с фенотипом CD3- CD56+ Молекула CD56 – адгезивная молекула, широко представленная в нервной ткани. Кроме натуральных киллеров, экспрессируется на многих типах клеток, в том число на Т-лимфоцитах.

Увеличение данного показателя свидетельствуют о расширении активности специфического клона клеток киллеров, которые имеют меньшую цитолитическую активность, чем NK-клетки с фенотипом CD3- CD16+. Количество этой популяции возрастает при гематологических опухолях (ЕК-клеточная или Т-клеточная лимфома, плазмоклеточная миелома, апластическая крупноклеточная лимфома), хронических заболеваниях, некоторых вырусных инфекциях.

Снижение отмечается при первичных иммунодефицитах, вирусных инфекциях, системных хронических заболеваниях, стрессе, лечении цитостатиками и кортикостероидами.

Рецептор CD95+ – один из рецепторов апоптоза. Апоптоз – сложный биологический процесс, необходимый для удаления из организма поврежденных, старых и инфицированных клеток. Рецептор CD95 экспрессируется на всех клетках иммунной системы. Он играет важную роль в контроле функционирования иммунной системы, так как является одним из рецепторов апоптоза. Его экспрессия на клетках определяет готовность клеток к апоптозу.

Снижение доли CD95+-лимфоцитов в крови пациентов свидетельствует о нарушении эффективности последнего этапа выбраковки дефектных и инфицированных собственных клеток, что может привести к рецидиву заболевания, хронизации патологического процесса, развитию аутоиммунных заболеваний и повышению вероятности опухолевой трансформации (к примеру, рака шейки матки при папилломотозной инфекции). Определение экспрессии CD95 имеет прогностическое значение при миело- и лимфопролифератиных заболеваниях.

Повышение интенсивности апоптоза наблюдается при вирусных заболеваниях, септических состояниях, при употреблении наркотических средств.

Активированные лимфоциты CD3+CDHLA-DR+, CD8+CD38+, CD3+CD25+, CD95. Тест отражает функциональное состояние Т-лимфоцитов и рекомендован для контроля за течением заболевания и контроля иммунотерапии при воспалительных заболеваниях разной этиологии.

www.cmd-online.ru

Иммунофенотипирование лимфопролиферативных заболеваний(проточная цитометрия

Онкоскрининги

Общая характеристика

Самая распространенная из форм лимфопролиферативных заболеваний в мире - хронический лимфоцитарный лейкоз (по данным Всемирной Органиации здравоохранения). Данное заболевание никогда не встречается у детей, большинство заболевших – пожилые люди; мужчины болеют в 2 раза чаще. Этиология неизвестна, хотя отмечена некоторая наследственная предрасположенность (чаще заболевают в тех семьях, где уже был когда-то диагностирован лимфопролиферативный процесс). В современной медицинской практике выделяют несколько форм хронического лимфолейкоза (ХЛЛ). От варианта заболевания зависит не только выбор правильного лечения, но и прогноз течения болезни, а также эффективность терапии.Имунофенотипирование клеток периферической крови и / или костного мозга методом проточной цитометрии обнаруживает специфические иммунологические маркеры, характерные для опухолевых клеток у пациентов с лимфопролиферативными заболеваниями для диагностики заболевания, выбора терапии, прогнозирования течения заболевания и эффективности терапии.Исследование комплексное, включает 22 специфических показателя и общий анализ крови( перед проведением иммунофенотипирования необходимо иметь результаты общего анализа крови).

Показания для назначения

Выявление в периферической крови абсолютного и относительного лимфоцитоза. Пороговый уровень лимфоцитоза, при котором считается необходимым проводить диагностическое ИФТ 5х109/л - 55% при общем количестве лейкоцитов 9х109/л

Маркер

Иммунологические маркеры, характерные для опухолевых клеток у пациентов с лимфопролиферативными заболеваниями

Клиническая значимость

Спектр диагностических маркеров позволяет-точно верифицировать подвариант заболевания- выделить группы риска для оптимальной терапии

- составить точный «иммунофенотипический» портрет опухолевых клеток для оценки количества остаточных опухолевых клеток после проведения терапии.

Биологический материал

Условия доставки

Контейнер

Объем

Плазма

Условия доставки:

48 Час. при температуре от 6 до 25 градусов Цельсия

Контейнер:

Система с ЭДТА без разделительного геля

Цельная кровь

Условия доставки:

Не хранится

Контейнер:

Система с ЭДТА без разделительного геля

Аспират костного мозга

Условия доставки:

Не хранится

Контейнер:

Система с ЭДТА без разделительного геля

Стандартные условия: Период голодания 8 часов (если другое  не определено врачом).  Можно пить воду.  Биоматериал принимается в соответствии с графиком взятия биоматериала в отделении МЛ ДІЛА.

 

Вы можете добавить данное исследование в корзину на этой странице

Интерпретация:

  • Для интерпретации важен анализ всех результатов: иммунофенотипического исследования и клинических и лабораторных данных.Необходимые критерии диагноза хронического лимфоцитарного лейкоза: - повышение абсолютного числа В-лимфоцитов в крови до или более 5х109/л; - лимфоциты должны иметь характерный иммунофенотип: на их поверхности обнаруживаются CD19, CD5, CD23, небольшие количества CD20 и CD79b, а также лёгкие цепи иммуноглобулинов;

    Другие формы ХЛПЗ будут иметь соответствующий своему подварианту «портрет» экспрессии специфических антигенов. В заключении описывается иммунологический профиль лимфоидной популяции с подтверждением соответствия полученного фенотипа варианту заболевания.

Образец результата (PDF)

Page 2

По техническим причинам отделение в г. Обухов 27.09 не работает.

×

dila.ua

Исследование крови на иммунофенотипирование

Исследование крови на иммунофенотипирование — один из наиболее точных методов диагностики. С помощью него обнаруживают и квалифицируют различные заболевания, подтверждают диагноз, также данный метод позволяет определить наиболее удачную схему лечения.

Все исследования проводятся высококвалифицированными сотрудниками ООО «ВЫМПЕЛ-МЕДЦЕНТР» в Москве по приемлемой стоимости: профессором, доктором медицинских наук Луговской С. А., доцентом, кандидатом медицинских наук Почтарь М. Е., доцентом, кандидатом медицинских наук Наумовой Е. В.

Какой биоматерила используется для анализа ИФТ?

В зависимости от задач исследования, материалом для анализа может служить:

  • периферическая кровь (взятие анализа осуществляется в медицинском центре «ВЫМПЕЛ-МЕДЦЕНТР»);
  • костный мозг (стернальная пункция выполняется врачом-гематологом стационара в пробирку с К2-ЭДТА);
  • ликвор (люмбальная пункция проводится врачом стационара, ликвор собирается в пробирку со стабилизатором Transfix);
  • выпотные жидкости (плевральная, асцитическая, перикардиальная — взятие материала проводится врачами стационаров).

Суть исследования заключается в том, что при его проведении определяются типы клеток крови. С помощью особого оборудования или люминесцентных микроскопов, легко распознать принадлежность каждой из этих клеток к тому или иному виду и выявить возможные поражения.

Как подготовиться к исследованию крови на иммунофенотипирование?

Забор биоматериала производится в утренние часы натощак. Перед проведением исследования, необходим период голодания, желательно, более 8 часов. Можно выпить небольшое количество воды. За несколько дней до процедуры недопустимо употребление алкоголя, курение сигарет, активные занятия спортом. На искажение результатов анализа ИФТ влияют тяжелые психоэмоциональные состояния.

Показания для проведения исследования

Как и любой анализ, иммунофенотипирование проводится по ряду причин. Основные из них:

  • Затяжной характер заболевания;
  • Острые воспалительные и вирусные поражения;
  • Подозрение на новообразования любого характера;
  • Анализ назначают перед проведением серьезных медицинских манипуляций;
  • Аллергические реакции;
  • При нарушении защитных функций организма;
  • Постоперационный период, сопровождающийся патологическими процессами;
  • Перед и после трансплантации внутренних органов;
  • Подозрение на наследственный или приобретенный иммунодефицит.

Обратите внимание, что интерпретировать результаты исследования крови на иммунофенотипирование нельзя самостоятельно и тем более, заниматься самолечением. Поставить точный диагноз может только врач-иммунолог, обращаясь также к другим результатам анализов и обследований. Нормы показателей отличаются в зависимости от пола и возраста пациента.

В нашем медицинском центре в Москве есть все необходимое для качественной диагностики — врачи с многолетним опытом, современное оборудование, дружелюбный сервис и разумная цена на услуги. С помощью анализа на ИФТ легко предотвратить страшную болезнь или обнаружить едва начавшиеся патологические процессы. Позаботьтесь о своем здоровье уже сегодня!

www.vympel-medcenter.ru


Смотрите также

Календарь

ПНВТСРЧТПТСБВС
     12
3456789
10111213141516
17181920212223
24252627282930
31      

Мы в Соцсетях

 

vklog square facebook 512 twitter icon Livejournal icon
square linkedin 512 20150213095025Одноклассники Blogger.svg rfgoogle